Терапия красным светом работает путем подачи света определенной длины волны — 630–660 нм. (красный) и 810–850 нм (почти инфракрас) — в кожу и подлежащие ткани, фотоны поглощаются ферментом цитохром с оксидазой. (CcO) внутри митохондрий. Это поглощение восстанавливает митохондриальный транспорт электронов., увеличивает АТФ (клеточная энергия) производство, высвобождает оксид азота для улучшения кровотока, и запускает защитные сигнальные пути, которые уменьшают воспаление и активируют антиоксидантную защиту.. Результат – ускоренное восстановление тканей., уменьшение боли и отека, и улучшение клеточной устойчивости. В следующем руководстве подробно объясняется каждый шаг этого каскада — с полными ссылками на рецензируемые исследования..
Краткое содержание: Когда красный (630–660 нм) или ближний инфракрасный (810–850 нм) свет поглощается цитохром-с-оксидазой в митохондриях, он запускает каскад последующих биологических эффектов — увеличение синтеза АТФ., краткий выброс активных форм кислорода (РОС), выделение оксида азота (НЕТ), и активация факторов транскрипции, таких как NF-κB. Вместе, эти реакции способствуют восстановлению тканей, уменьшить воспаление, и поддерживают устойчивость сотовой связи. Величина этих эффектов соответствует двухфазной кривой «доза-реакция».: умеренные дозы стимулируют, в то время как чрезмерные дозы подавляют.
Введение: От фотона к биологии
Терапия красным светом — более точно известная как фотобиомодуляция (Pbm) — это не смутный оздоровительный тренд. Это фотохимический процесс с хорошо изученными молекулярными мишенями., измеримые клеточные выходы, и десятилетия рецензируемых доказательств. Тем не менее, большинство онлайн-объяснений останавливаются на фразе «он повышает АТФ», не объясняя как, почему, или что будет дальше.
Это руководство идет глубже. Мы прослеживаем полный сигнальный каскад с момента поглощения фотона красного или ближнего инфракрасного света его первичной молекулярной мишенью внутри митохондрий., за счет последующего воздействия на воспаление, окислительный стресс, и восстановление тканей. Оцениваете ли вы технологию PBM для клинического применения, разработка продукта, или обучение бренду, понимание этих механизмов необходимо для принятия обоснованных решений..
Совет по навигации: В этой статье рассматривается биологическая наука о ПБМ.. Технические характеристики устройства, видеть Технология светодиодной терапевтической панели. Для вариантов партнерства OEM/ODM, посещать OEM-услуги Wakelife.
1. Первичная молекулярная мишень: Цитохром с-оксидаза (CcO)
История PBM начинается внутри митохондрии — органеллы, ответственные за производство подавляющего большинства клеточной энергии..
Во внутренней мембране митохондрий находится фермент, называемый цитохром с оксидаза (CcO), также известный как Комплекс IV цепи переноса электронов (И Т. Д). CcO — концевой фермент в цепи: он принимает электроны, соединяет их с кислородом, и управляет протонным градиентом, который обеспечивает синтез АТФ.
CcO содержит металлоцентры — медь (КуА, CuB) и гемовое железо (гем а, гем а₃) - которые действуют как хромофоры. Эти хромофоры поглощают фотоны в двух определенных диапазонах длин волн.:
- Красный свет: 630–680 нм (пик поглощения гема а и гема а₃)
- Ближний инфракрасный диапазон (Нир) свет: 800–880 нм (пик поглощения CuA)
Впервые это было подробно охарактеризовано Тиина Кару посредством исследования спектра действия, которые продемонстрировали, что спектр биологического действия ПБМ близко соответствует спектру поглощения окисленного CcO. (Увеличивать, 2008).
Что происходит, когда CcO поглощает фотон?
В нормальных условиях — особенно при клеточном стрессе, гипоксия, или воспаление — оксид азота (НЕТ) связывается с сайтом связывания кислорода на CcO (биядерный центр CuB/гем a₃). Это НЕ привязка конкурентно тормозит деятельность CcO, эффективно тормозя митохондриальное дыхание.
Когда красные или ближние ИК-фотоны поглощаются CcO, они фотодиссоциировать НЕТ из места связывания. Это снимает торможение и восстанавливает нормальный поток электронов через ETC..
Немедленный последующий результат: увеличение производства АТФ.
2. СПС: Энергетическая валюта, которая движет всем вниз по течению
Аденозинтрифосфат (СПС) является универсальной энергетической валютой биологических клеток. Каждый клеточный процесс — от синтеза белка и восстановления ДНК до сокращения мышц и высвобождения нейромедиаторов — требует АТФ..
Когда PBM восстанавливает активность CcO и ускоряет транспорт электронов, градиент протонов через внутреннюю мембрану митохондрий увеличивается. Это приводит АТФ-синтаза (Комплекс V) производить больше АТФ из АДФ и неорганического фосфата.
Почему повышение АТФ имеет клиническое значение??
| Клеточный процесс | Требование АТФ | Актуальность для приложений PBM |
|---|---|---|
| Синтез коллагена | Высокий | Омоложение кожи, заживление ран |
| Пролиферация клеток | Высокий | Восстановление тканей, активация волосяного фолликула |
| Восстановление мышечных волокон | Высокий | Восстановление после тренировки |
| Активность ионного насоса (Na⁺/K⁺-АТФаза) | Непрерывный | Функция нерва, уменьшение отеков |
| Активация иммунных клеток | Переменная | Разрешение воспаления |
Это не незначительный эффект. Клетки с истощенным АТФ — из-за старения, рана, ишемия, или хроническое воспаление — это именно те клетки, которые наиболее резко реагируют на PBM.. Здоровые клетки с уже оптимальным уровнем АТФ демонстрируют минимальный дополнительный ответ., что частично объясняет благоприятный профиль безопасности PBM и двухфазная картина «доза-реакция» обсуждается в разделе 6.
3. оксид азота (НЕТ) Выпускать: Вазодилатация и сигнализация
NO, фотодиссоциированный из CcO, не исчезает просто так.. После выпуска, это становится биоактивная сигнальная молекула с важными физиологическими эффектами:
расширение сосудов: NO активирует растворимую гуанилатциклазу (ЮГК) в гладкомышечных клетках сосудов, увеличение циклического GMP (цГМФ) и вызывая расслабление кровеносных сосудов. Это улучшает местное микроциркуляция, доставка кислорода, и транспорт питательных веществ к обрабатываемой ткани.
Антитромбоцитарные эффекты: NO ингибирует агрегацию тромбоцитов, снижение риска микрососудистого тромбообразования в поврежденных тканях.
Модуляция нейротрансмиссии: В нервной ткани, NO действует как ретроградный нейромедиатор., влияние на синаптическую пластичность.
Воспалительная сигнализация: В физиологических концентрациях, NO модулирует воспалительные каскады (обсуждается далее в разделе 5).
Сосудорасширяющий эффект высвобождения NO является одной из причин, почему PBM часто производит видимое покраснение кожи сразу после лечения — преходящий признак увеличения кровотока, не повреждение тканей.
4. Активные формы кислорода (РОС): Краткий сигнальный пакет, Не повреждение
Одним из наиболее неправильно понимаемых аспектов ПБМ является его связь с активными формами кислорода. (РОС).
Когда активность CcO увеличивается и транспорт электронов ускоряется, есть краткий, низкое увеличение митохондриальных АФК - преимущественно супероксид (О₂⁻) в Комплексе I и Комплексе III. Это нормальное следствие увеличения потока электронов..
Вреден ли этот взрыв ROS??
Нет, в этом контексте, это сигнальное событие.
Временный импульс АФК активирует два критически важных окислительно-восстановительных фактора транскрипции.:
- НФ-кБ (ядерный фактор, усилитель каппа-легкой цепи активированных В-клеток)
- №2 (ядерный фактор, связанный с эритроидом 2 2)
Эти транскрипционные факторы перемещаются в ядро и активировать экспрессию защитных генов — включая антиоксидантные ферменты, противовоспалительные медиаторы, и факторы выживания клеток.
Это ключевое отличие: PBM не вызывает окислительного повреждения; он запускает собственную защитную реакцию клетки посредством контролируемого сигнала АФК. В клетках, которые уже находятся в состоянии окислительного стресса (НАПРИМЕР., от хронического воспаления или повреждения УФ-излучением), чистый эффект PBM на самом деле является снижение при окислительном повреждении, потому что усиленная антиоксидантная защита перевешивает кратковременный импульс АФК (де Фрейтас & Хамблин, 2016).
5. Противовоспалительные механизмы: НФ-кБ, Макрофаги, и модуляция цитокинов
Уменьшение воспаления является одним из наиболее клинически воспроизводимый эффекты ПБМ. Противовоспалительные механизмы действуют через несколько параллельных путей.:
5.1 Модуляция NF-κB
NF-κB является главным регулятором экспрессии воспалительных генов.. Его роль в PBM контекстно-зависимый и часто искажается в упрощенных объяснениях:
- В покоящихся или слегка напряженных клетках: Сигнал ROS PBM может временно активировать NF-κB, активация защитных систем клетки.
- В уже воспаленных клетках (где NF-κB хронически гиперактивирован): Pbm подавляет Активность NF-κB, снижение транскрипции провоспалительных генов.
Эта контекстно-зависимая модуляция имеет решающее значение — это означает, что PBM помогает нормализовать воспалительная сигнализация, а не просто ее подавление или активация (Хамблин, 2017).
5.2 Поляризация макрофагов
Макрофаги существуют в фенотипическом спектре.:
- М1 (классически активированный): Провоспалительный, разрушающий ткани, доминирует при остром и хроническом воспалении.
- М2 (альтернативно активированный): Противовоспалительное средство, восстановление тканей, доминирует в разрешении исцеления.
Было показано, что PBM сместить поляризацию макрофагов с M1 на M2, ускорение перехода от воспалительной фазы к восстановительной фазе заживления тканей. Этот эффект был задокументирован при заживлении ран., воспаление суставов, и модели нейровоспаления (Хамблин, 2017).
5.3 Цитокиновая модуляция
Ниже модуляции NF-κB и смещения фенотипа макрофагов, PBM снижает уровни ключевых провоспалительных цитокинов:
| Цитокин | Направление после PBM | Значение |
|---|---|---|
| ФНО-α | ↓ Снижение | Основной фактор системного воспаления |
| ИЛ-1β | ↓ Снижение | Медиатор боли и лихорадки |
| Ил-6 | ↓ Снижение | Маркер острой фазы воспаления |
| Ил-10 | ↑ Увеличение | Противовоспалительное средство, способствует заживлению |
| ТФР-β | ↑ Увеличение (контекстно-зависимый) | Ремоделирование тканей, регуляция фиброза |
6. Активация антиоксидантной защиты: Путь Nrf2
В то время как NF-κB отвечает за регуляцию воспалительных генов, №2 является главным регулятором экспрессия антиоксидантных и цитопротекторных генов.
Как PBM активирует Nrf2:
- Короткий импульс АФК из-за повышенной активности митохондрий окисляет Кеап1, цитоплазматический белок, который обычно секвестрирует Nrf2 и помечает его для деградации.
- Окисленный Keap1 выпускает Nrf2.
- Свободный Nrf2 перемещается в ядро и связывается с Элементы антиоксидантного ответа (ЯВЛЯЮТСЯ) в промоторных регионах ДНК.
- Это запускает транскрипцию батареи защитных ферментов.:
| Фермент | Функция |
|---|---|
| Супероксиддисмутаза (ДЕРН) | Превращает супероксидный радикал в перекись водорода. |
| Каталаза | Преобразует перекись водорода в воду и кислород. |
| Глутатионпероксидаза (ГПкс) | Уменьшает количество перекисей с помощью глутатиона |
| Гемоксигеназа-1 (НО-1) | Разрушает свободный от прооксидантов гем; производит CO (противовоспалительное средство) и биливердин (антиоксидант) |
| ОНИ(П)H-хинондегидрогеназа 1 (НКО1) | Двухэлектронное восстановление хинонов, предотвращение образования свободных радикалов |
Конечным результатом является то, что PBM повышает эндогенную антиоксидантную способность клеток. Это особенно важно для:
- Старение кожи (где кумулятивное окислительное повреждение, вызванное УФ-излучением, приводит к деградации коллагена и пигментации)
- нейродегенерация (где окислительный стресс способствует гибели нейронов)
- Заживление хронических ран (где постоянный окислительный стресс останавливает процесс восстановления)
Эта защита, опосредованная Nrf2, имеет более длительный эффект, чем немедленное повышение уровня АТФ — уровни антиоксидантных ферментов остаются повышенными в течение всего времени. часы в дни после одного сеанса PBM (де Фрейтас & Хамблин, 2016).
7. Двухфазный ответ на дозу: Почему больше не всегда лучше
Одним из наиболее важных принципов PBM является двухфазный (горметик) кривая доза-реакция, также называется Закон Арндта-Шульца в фотобиологии.
Этот принцип гласит:
- Низкие и умеренные дозы света производят стимулирующее, благотворное воздействие.
- Чрезмерные дозы оказывать тормозящее действие или не оказывать никакого эффекта вообще.
Это было тщательно задокументировано для всех типов клеток., модели животных, и клинические исследования (Хуанг и др., 2009).
Что это означает на практике?
| Параметр | Типичное терапевтическое окно | Примечания |
|---|---|---|
| Длина волны | 630–660 нм (красный); 810–850 нм (Нир) | Должен соответствовать пикам поглощения CcO. |
| Излучение (плотность мощности) | 10–100 мВт/см² на поверхности ткани | Зависит от целевой глубины |
| Флюенс (плотность энергии) | 1–10 Дж/см² (поверхностный); до 50 J/CM² (глубокая ткань) | Выше НЕ всегда лучше |
| Время лечения | Определяется интенсивностью излучения × желаемой плотностью энергии | Типичный: 5–20 минут на зону |
Почему передозировка скорее тормозит, чем помогает?
Преобладающая гипотеза состоит в том, что чрезмерная продукция АФК из чрезмерно стимулированных митохондрий подавляет антиоксидантную реакцию Nrf2, смещение баланса от сигналов к подлинному окислительному повреждению. Кроме того, чрезмерное высвобождение NO само по себе может стать ингибирующим функцию митохондрий при высоких концентрациях, воссоздавая то самое ингибирование CcO, которое PBM должен снимать. (Хуанг и др., 2009).
Это критическое соображение для проектирование устройств и разработка протоколов. Хорошо спроектированное устройство PBM должно обеспечивать правильное излучение на предполагаемом расстоянии лечения., с точным таймингом, чтобы убедиться, что доза попадает в терапевтическое окно. Простое увеличение мощности светодиодов без учета расстояния лечения, угол луча, и время воздействия может вывести дозу за пределы оптимального диапазона..
Для покупателей устройств и разработчиков брендов: Панели Wakelife разработаны с калиброванной мощностью излучения на определенных расстояниях лечения., помогает гарантировать, что дозы остаются в пределах научно обоснованного терапевтического окна. → Посмотреть характеристики панели | → Обсудите индивидуальные протоколы с нашей командой
8. Собираем все вместе: Резюме о каскаде PBM
- расширение сосудов (рГК → цГМФ)
- Улучшение микроциркуляции
- Увеличение доставки O₂
- Воспалительная модуляция
- Снижение сосудистого сопротивления
- Синтез коллагена
- Пролиферация клеток
- Восстановление мышц и тканей
- Активность ионного насоса (На+/К+)
- Повышенная скорость метаболизма
- ↓ Провоспалительные цитокины
- ↑ Противовоспалительные цитокины
- Сдвиг макрофагов М1 → М2
- ДЕРН, Каталаза, ГПкс
- ↑ Производство НО-1
- Длительная цитопротекция
9. Клиническая значимость: От механизма к применению
Понимание этих механизмов является не просто академическим вопросом.. Для производителей устройств, владельцы брендов, и практикующие врачи, знание механизма напрямую информирует:
| Область принятия решений | Актуальность механизма |
|---|---|
| Выбор длины волны | Должен соответствовать пикам поглощения CcO. (630–660 нм, 810–850 нм) |
| Выходная мощность | Необходимо достичь терапевтического излучения на предполагаемом расстоянии лечения. |
| Протоколы лечения | Должен соблюдаться двухфазный ответ на дозу — правильная плотность энергии, не максимальная флюенс |
| Маркетинговые претензии | Должно точно отражать, что может и не может сделать PBM., основанный на реальной биологии |
| Дифференциация продукта | Понимание синергии нескольких длин волн позволяет создавать более разумные конфигурации панелей. |
Для более глубокого изучения того, как эти механизмы применяются в конкретных клинических областях., см. наши руководства, ориентированные на приложения:
- Терапия красным светом для омоложения кожи (скоро запуск)
- Терапия красным светом от боли и восстановления (скоро запуск)
Создание линейки продуктов для светотерапии?
Понимание механизмов PBM поможет вам делать точные заявления и выбирать правильные спецификации.. Wakelife предлагает OEM/ODM светодиодные терапевтические устройства, подтвержденные опубликованными научными исследованиями.
Часто задаваемые вопросы
Как терапия красным светом работает на клеточном уровне?
Красный свет (630–660 нм) и ближний инфракрасный свет (810–850 нм) поглощаются цитохром с оксидазой (CcO), фермент внутри митохондрий. Это поглощение вытесняет оксид азота из CcO., восстанавливает транспорт электронов, и увеличивает выработку АТФ. Результатом является каскад полезных последующих эффектов — больше клеточной энергии., лучший кровоток, уменьшение воспаления, и активация антиоксидантной защиты. В отличие от УФ-излучения или термических лазеров, PBM работает посредством фотохимических реакций., не нагревать.
Что такое АТФ и почему это важно для результатов светотерапии?
СПС (аденозинтрифосфат) Это основная энергетическая молекула, используемая каждой клеткой организма.. Когда PBM увеличивает выработку АТФ, клетки имеют больше топлива для важных процессов, таких как синтез коллагена, деление клеток, заживление ран, и восстановление мышц. Вот почему более высокие уровни АТФ после сеансов светотерапии напрямую приводят к видимым результатам — более упругой коже., более быстрое заживление, и уменьшение мышечной боли.
Действительно ли терапия красным светом уменьшает воспаление?? Каковы доказательства?
Да. Противовоспалительный эффект является одним из наиболее воспроизводимых результатов исследований PBM.. Механизмы включают снижение активности NF-κB в уже воспаленных клетках., сдвиг фенотипа макрофагов с провоспалительного (М1) для восстановления тканей (М2), и измеримое снижение уровня провоспалительных цитокинов, таких как TNF-α., ИЛ-1β, и Ил-6. Эти эффекты были зарегистрированы при воспалении суставов., заживление ран, заболевания легких, и модели нейровоспаления (Хамблин, 2017).
Может ли слишком много терапии красным светом быть вредным?? Что произойдет, если я переусердствую?
PBM следует двухфазной кривой доза-эффект (также называется законом Арндта-Шульца). Умеренные дозы в терапевтическом окне (обычно 1–10 Дж/см² в зависимости от целевой ткани) оказывать благотворное воздействие. Однако, чрезмерные дозы могут подавлять клеточную активность и сводить на нет пользу.. Вот почему дизайн устройства и протоколы лечения имеют большое значение.: большая мощность не означает автоматически лучшие результаты. Хорошо спроектированное устройство должно эффективно доставлять правильную дозу в целевую ткань. (Хуанг и др., 2009).
Какова роль оксида азота (НЕТ) в фотобиомодуляции?
Оксид азота высвобождается цитохром-с-оксидазой при поглощении красного/ближнего инфракрасного света.. Когда-то бесплатно, NO действует как мощное сосудорасширяющее средство — расслабляет стенки кровеносных сосудов., увеличение местного кровотока и доставки кислорода в обрабатываемую область.. Улучшенная микроциркуляция способствует заживлению ран., облегчение боли, и более здоровый вид кожи. NO также участвует в модуляции воспалительной сигнализации., способствуя противовоспалительным свойствам PBM.
Вызывает ли терапия красным светом свободные радикалы?? Это опасно??
PBM готовит краткое описание, низкий уровень выброса активных форм кислорода (РОС) сразу после поглощения света. Однако, этот небольшой импульс АФК действует как полезный сигнальный триггер — он активирует защитные факторы транскрипции. (NF-κB и Nrf2) которые активируют собственные антиоксидантные ферменты организма, такие как супероксиддисмутаза (ДЕРН) и глутатионпероксидаза. В окислительно стрессированных или поврежденных тканях, конечным эффектом PBM на самом деле является снижение окислительного повреждения., не увеличение (де Фрейтас & Хамблин, 2016).
Чем отличается красный свет (630–660 нм) и ближний инфракрасный свет (810–850 нм)?
Обе длины волн поглощаются цитохром-с-оксидазой и запускают один и тот же основной нижестоящий каскад. (СПС, НЕТ, Сигнализация ROS). Основное отличие – глубина проникновения.. Красный свет (630–660 нм) впитывается более поверхностно и идеально подходит для применения на уровне кожи, например, против старения., прыщи, и заживление ран. Ближний инфракрасный свет (810–850 нм) проникает глубже в мышцы, соединение, и костная ткань, что делает его более подходящим для облегчения боли, восстановление мышц, и более глубокое восстановление тканей. Многие клинические протоколы сочетают оба диапазона длин волн для достижения синергетического эффекта..
Сколько времени нужно, чтобы увидеть результаты терапии красным светом?
Результаты зависят от приложения, доза, и индивидуальное состояние. Для омоложения кожи, многие клинические исследования сообщают о заметном уменьшении морщин., тон кожи, и плотность коллагена после 8–12 недель последовательного лечения (обычно 3–5 занятий в неделю). При острой боли и воспалении, некоторые пользователи замечают облегчение в течение нескольких часов или дней.. Для восстановления мышц, преимущества можно измерить в течение 24–72 часов после тренировки, если PBM применяется перед- или после тренировки (Феррарези и др., 2016; Авчи и др., 2013).
Как механизмы PBM преобразуются в спецификации устройств для покупателей?
Понимание последующей биологии помогает покупателям оценить, действительно ли устройство может обеспечить терапевтические результаты.. Ключевые характеристики для оценки включают в себя: выбор длины волны (включает ли он проверенные длины волн PBM, такие как 630, 660, 810, 850 н.м.?), облучение на расстоянии лечения (достаточно ли он силен, чтобы достичь целевой ткани??), покрытие зоны лечения, и таймер/контроль дозы (оставаться в пределах двухфазного оптимального окна). Светодиодные терапевтические панели Wakelife разработаны для передачи клинически значимых длин волн при соответствующих уровнях излучения.. → Посмотреть характеристики светодиодной панели Wakelife
Может ли Wakelife настраивать комбинации длин волн и выходную мощность для заказов OEM?
Да. Wakelife предоставляет услуги OEM и ODM, включая настройку количества светодиодных шариков., комбинации длин волн, цвет корпуса, печать логотипа, дизайн упаковки, и инструкции по эксплуатации. Это позволяет владельцам брендов разрабатывать дифференцированные продукты, ориентированные на конкретные приложения, например, панель, ориентированная на кожу, подчеркивающая 630/660 nm или группа, ориентированная на восстановление, подчеркивающая 810/850 н.м.. → Узнайте об услугах Wakelife OEM/ODM
Ссылки
Увеличивать, Т. я. (2008). Митохондриальная передача сигналов в клетках млекопитающих, активируемая красным и ближним ИК-излучением. Фотохимия и фотобиология, 84(5), 1091–1099. ПабМед
Хамблин, М. Ведущий. (2017). Механизмы и применение противовоспалительного действия фотобиомодуляции.. АИМС Биофизика, 4(3), 337–361. Полный текст ЧВК
Хуан, Да. Ю., Чен, А. С., Кэрролл, Дж. Д., & Хамблин, М. Ведущий. (2009). Двухфазный ответ на дозу при светотерапии низкой интенсивности. Доза-реакция, 7(4), 358–383. Полный текст ЧВК
де Фрейтас, л. Ф., & Хамблин, М. Ведущий. (2016). Предлагаемые механизмы фотобиомодуляции или светотерапии низкого уровня. Журнал IEEE по избранным темам квантовой электроники, 22(3), 7000417. Полный текст ЧВК
Феррара, С., Хуан, Да. Ю., & Хамблин, М. Ведущий. (2016). Фотобиомодуляция в мышечной ткани человека: преимущество в спортивных результатах? Журнал биофотоники, 9(11-12), 1273–1299. Полный текст ЧВК
Охотник, П., Гупта, А., Садасивам, М., Веккьо, Д., Пэм, З., Пэм, Н., & Хамблин, М. Ведущий. (2013). Лазер низкого уровня (свет) терапия (Вполне) в коже: стимулирующий, выздоровление, восстановление. Семинары по кожной медицине и хирургии, 32(1), 41–52. Полный текст ЧВК
Бароле, Д. (2008). Светодиоды (Светодиоды) в дерматологии. Семинары по кожной медицине и хирургии, 27(4), 227–238. ПабМед
